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          变波谱法长高测定菜中一的安同时酱腌和脱氢乙效液相色赛蜜酸

          2025-05-15 04:39:19 来源:彩翼云栈   

          你猜不着第 31 关怎么过?全关卡图文通关攻略大全

          酱腌菜,变波在GB2760-2014中的长高测定菜中分类为腌渍的蔬菜,是效液相色我国传统的消费食品,也是谱法广大消费者比较喜欢的食品之一。食品添加剂在酱腌菜的酱腌加工过程中已经广泛使用,最常用的赛蜜酸添加剂为防腐剂(苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸)和甜味剂(糖精钠、和脱安赛蜜)。氢乙添加防腐剂能够抑制产品中腐败微生物的变波生长,延长酱腌菜产品的长高测定菜中保质期;添加甜味剂则是为了增加产品的风味口感。过量的效液相色食品添加剂会对人体健康造成危害,虽然GB2760-2014已经规定了酱腌菜中这些添加剂的谱法使用限量,但不排除个别生产企业为了延长产品保质期等目的酱腌而超量使用食品添加剂,因此有必要对酱腌菜中的赛蜜酸添加剂含量进行检测。国标方法GB5009.28-2016能够同时检测食品中苯甲酸、和脱山梨酸和糖精钠含量,而且方法比较简单,适用于酱腌菜产品。

          检测脱氢乙酸的国标方法有GB5009.121-2016、GB/T23377-2009,而检测安赛蜜的国标方法GB/T5009.140-2003仅适用于饮料产品的检测,并不适用于酱腌菜产品。目前报道的安赛蜜检测方法有离子色谱法、液质联用法、超高效液相色谱法和液相色谱法。离子色谱法的前处理比较繁琐、液质联用法仪器比较昂贵、超高效液相法对色谱柱要求较高,而高效液相色谱仪为检测机构的基础设备,又能满足安赛蜜的检测。因此拟采用高效液相色谱法测定酱腌菜中的安赛蜜,而脱氢乙酸也可以用高效液相色谱法测定,本研究建立了一种变波长高效液相色谱法同时测定酱腌菜中安赛蜜和脱氢乙酸的方法。该方法前处理简单、回收率高、精密度高,可用于酱腌菜中甜味剂安赛蜜和防腐剂脱氢乙酸的检测。

          一、材料与方法

          1、材料与试剂

          酱腌菜样品(榨菜、雪菜、萝卜干、乳黄瓜等)购于无锡市各超市;安赛蜜、脱氢乙酸标准品购于德国Dr.Ehrenstorfer公司,纯度大于99.5%;
          甲醇(色谱纯,迪马科技);氢氧化钠、硫酸锌、乙酸铵(分析纯,国药集团);微孔滤膜(0.45µm,上海安谱);实验用超纯水为实验室Mili-Q超纯水机制备。

          2、仪器与设备

          1260型高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器(DAD)(美国安捷伦公司);IKA旋涡混匀器(广州艾卡);超声波清洗机(无锡思耐德);CT14D离心机(南京瑞兰达);ME204E分析天平、pH计(瑞士梅特勒公司)。

          3、实验方法

          (1)溶液配制

          氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠,加水溶解并定容至1000mL;硫酸锌溶液:称取120g硫酸锌,加水溶解并定容至1000mL;乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水溶解并定容至1000mL;安赛蜜标准溶液配制:称取安赛蜜标准品0.10g(精确至0.0001g),用水溶解并定容至100mL,标准储备液的浓度为1000mg/L,贮存于4℃冰箱中。使用时根据需要用水稀释成适当浓度的标准使用液,现配现用。脱氢乙酸标准溶液配制:称取脱氢乙酸标准品0.10g(精确至0.0001g),用10mL氢氧化钠溶液溶解并用水定容至100mL,标准储备液的浓度为1000mg/L,贮存于4℃冰箱中。使用时根据需要用水稀释成适当浓度的标准使用液,现配现用。

          (2)样品前处理

          称取2.50g经粉碎、混匀的样品至25mL比色管中,加入10mL水、5mL硫酸锌溶液,涡旋混匀,用氢氧化钠溶液调pH至7.5,用水定容至25mL,超声提取10min,转移至50mL离心管内,5000r/min离心10min,上清液经0.45μm滤膜过滤作为测定液,用高效液相色谱仪测定。

          (3)高效液相色谱条件

          色谱柱:AgilentZORBAXXDB-C18(250×4.6mm,5μm,美国安捷伦公司);流动相:90%0.02mol/L乙酸铵溶液+10%甲醇;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长程序:0~8min,226nm;8~12min,293nm。

          二、结果与分析

          1、样品前处理条件的优化

          GB5009.121-2016样品中脱氢乙酸是以水来提取的,考虑到安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)易溶于水,所以以水来提取酱腌菜中的安赛蜜和脱氢乙酸。酱腌菜中含有少量的蛋白质等成分,如果不去除将这些成分将会干扰测定。本实验采用加标回收实验比较了两类沉淀剂(亚铁氰化钾和乙酸锌、氢氧化钠和硫酸锌)的沉淀分离效果。经氢氧化钠与硫酸锌沉淀后,对样品中的安赛蜜和脱氢乙酸的测定均无影响,加标回收率接近100%;而经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀后,对样品中安赛蜜的测定无影响,但对脱氢乙酸的测定有影响,加标回收率仅为80%左右,可能是因为脱氢乙酸在水中的溶解度较低,随着蛋白质等杂质一起沉淀下来。因而,实验采用氢氧化钠与硫酸锌作为沉淀剂。

          2、变波长检测条件的确定

          将适当浓度的安赛蜜标准溶液、脱氢乙酸标准溶液分别采用DAD进行光谱扫描,以确定其最佳吸收波长。由图1可知,安赛蜜的最佳吸收波长为226nm。由图2可知,脱氢乙酸的最佳吸收波长有两个,分别为230nm和293nm。考虑到对羟基苯甲酸酯类、苯甲酸、山梨酸等防腐剂在230nm处也有较大吸收,选择293nm作为脱氢乙酸的特异检测波长。

          在选定的色谱条件下,安赛蜜的出峰时间在6min左右,脱氢乙酸的出峰时间为10min左右,所以选定变波长检测程序为:0~8min,226nm;8~12min,293nm。

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